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人主動脈夾層血管平滑肌細胞的培養和鑒定

作者:盧琳; 吳錫階; 彭華; 陳良萬 福建醫科大學附屬協和醫院心外科; 福州350001

摘要:目的建立人主動脈夾層(AD)血管平滑肌細胞(VSMC)體外培養的方法。方法以AD患者手術時切除的血管為原料,用組織塊貼壁法進行VSMC的體外原代和傳代培養,倒置顯微鏡觀察細胞的生長情況,考馬斯亮藍染色、α-SMA及Ⅷ因子免疫熒光染色和透射電鏡檢測鑒定細胞。結果7~10d原代細胞從組織塊邊緣遷移出來,3~4周細胞生長至融合,可進行傳代。原代和傳代的細胞生長良好,倒置顯微鏡下見細胞呈長梭形,有多個突起。細胞呈"峰谷狀"生長,具有典型的VSMC特征。考馬斯亮藍染色和透射電鏡下均可見細胞內有大量沿長軸生長的肌絲,α-SMA免疫熒光染色強陽性,Ⅷ因子免疫熒光染色陰性,證明所培養的細胞為VSMC。細胞傳代至第6代以后開始出現老化現象。結論應用組織塊貼壁培養的方法可成功地在體外培養人AD的VSMC,為今后研究AD的發病機制提供良好的實驗基礎。

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福建醫科大學學報雜志

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