不同細(xì)胞外泌體的分離與特性研究
作者：李昕; 劉瑜; 尹宗寧 四川大學(xué)華西藥學(xué)院; 四川成都610041
摘要：目的探究人肺癌細(xì)胞A549與小鼠黑色素瘤細(xì)胞B16-F10不同細(xì)胞外泌體的性質(zhì)及促細(xì)胞增殖能力的差異。方法采用超速離心法及Exo Qμick試劑盒法提取A549細(xì)胞及B16-F10細(xì)胞培養(yǎng)上清液中的外泌體;利用透射電鏡觀察外泌體的形態(tài),采用動(dòng)態(tài)光散射法測(cè)定粒徑,用SDS-PAGE電泳技術(shù)分析外泌體的蛋白分布,采用Western blot技術(shù)分析其特異蛋白TSG 101的表達(dá),用MTT法測(cè)定外泌體促細(xì)胞的增殖能力。結(jié)果超速離心法和Exo Qμick試劑盒法均可用于提取外泌體,A549及B16-F10細(xì)胞外泌體均呈圓形膜性囊泡結(jié)構(gòu);提取的外泌體樣本均有外泌體特異性標(biāo)記蛋白TSG 101的表達(dá),B16-F10細(xì)胞外泌體促細(xì)胞增殖能力更佳。結(jié)論超速離心法分離的外泌體純度高,促細(xì)胞增殖能力好。
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華西藥學(xué)雜志
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