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四種鱗翅目害蟲(chóng)精氨酸激酶基因的表達(dá)譜及基于RNAi的功能分析

作者:魯艷輝; 白琪; 鄭許松; 田俊策; 呂仲賢 浙江省農(nóng)業(yè)科學(xué)院植物保護(hù)與微生物研究所; 省部共建農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室(籌); 杭州310021

摘要:【目的】精氨酸激酶(arginine kinase,AK)(EC2.7.3.3)是昆蟲(chóng)體內(nèi)重要的磷酸原激酶(能量代謝調(diào)節(jié)因子),也是唯一能夠形成有效ATP的磷酰基供體,起著與脊椎動(dòng)物中肌酸激酶相同的作用。本研究旨在了解鱗翅目害蟲(chóng)AK基因的表達(dá)和功能。【方法】利用qRT-PCR方法測(cè)定AK基因在大螟Sesamia inferens、二化螟Chilo suppressalis、甜菜夜蛾Spodoptera exigua和斜紋夜蛾Spodoptera litura這4種鱗翅目害蟲(chóng)不同發(fā)育階段和3齡幼蟲(chóng)不同組織中的表達(dá)譜;通過(guò)終點(diǎn)法檢測(cè)了這4種害蟲(chóng)不同發(fā)育階段和幼蟲(chóng)不同組織中的AK酶活性;采用RNAi技術(shù)抑制該基因的表達(dá)并分析其功能。【結(jié)果】AK基因在大螟、二化螟、甜菜夜蛾和斜紋夜蛾這4種鱗翅目昆蟲(chóng)的不同發(fā)育階段和3齡幼蟲(chóng)不同組織中均有表達(dá),說(shuō)明該基因的表達(dá)不具有發(fā)育時(shí)期和組織特異性。不同發(fā)育時(shí)期和3齡幼蟲(chóng)不同組織中AK酶活性與基因表達(dá)量變化趨勢(shì)大體一致。注射以AK基因?yàn)榘袠?biāo)的dsRNA6d后,4種害蟲(chóng)體內(nèi)AK基因的mRNA表達(dá)下降30%~50%,AK酶活性降低30%左右;14d后幼蟲(chóng)的死亡率達(dá)50%左右,顯著高于對(duì)照組幼蟲(chóng)的死亡率。【結(jié)論】AK基因在上述4種鱗翅目害蟲(chóng)中為組成型表達(dá),RNAi抑制AK基因的表達(dá)可導(dǎo)致4種害蟲(chóng)的幼蟲(chóng)死亡,研究結(jié)果為開(kāi)發(fā)以AK基因?yàn)榘袠?biāo)的鱗翅目害蟲(chóng)防治新技術(shù)提供了理論依據(jù)。

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昆蟲(chóng)學(xué)報(bào)雜志, 月刊,本刊重視學(xué)術(shù)導(dǎo)向,堅(jiān)持科學(xué)性、學(xué)術(shù)性、先進(jìn)性、創(chuàng)新性,刊載內(nèi)容涉及的欄目:研究論文_生理與生化、研究論文_生態(tài)與害蟲(chóng)治理、綜述、研究論文_進(jìn)化與系統(tǒng)學(xué)、研究論文_病理與微生物、研究論文_毒理與抗性、簡(jiǎn)報(bào)、書(shū)評(píng)等。于1950年經(jīng)新聞總署批準(zhǔn)的正規(guī)刊物。

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