利用Red重組系統敲除鮑曼不動桿菌 asaA 基因
作者：李磊; 王一諾; 鄒清華 北京大學基礎醫學院病原生物學系; 北京100191; 全國醫學教育發展中心; 北京10019
摘要：目的利用Red重組系統敲除鮑曼不動桿菌ATCC17978的asaA。方法設計上下游引物中包含asaA的同源序列,并以pKD4質粒為模板,擴增含有卡那霉素抗性基因的DN段。將該片段轉化于表達重組酶的17978感受態細胞中,在卡那霉素篩選壓力下,得到經兩次同源雙交換的具有卡那霉素基因標記的突變菌株。隨后,在重組酶的作用下將抗性基因去除,最終得到無抗性基因標記的突變菌株ΔasaA。結果通過該重組系統,首先將卡那霉素抗性基因的DN段替換了基因組中asaA的DN段,然后將卡那霉素抗性基因的DN段消除,最終獲得了asaA缺失的突變體。結論通過Red重組系統為鮑曼不動桿菌中其他基因的缺失突變提供方法與思路。
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微生物學免疫學進展雜志
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