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快速檢測漢灘病毒新型實時熒光定量RT-PCR方法的建立與應用

作者:何芳; 楊鵬飛; 陳國清; 唐麗; 燕清麗; 劉純成; 趙懷榮 淮安市疾病預防控制中心; 江蘇淮安223001; 鹽城市疾病預防控制中心

摘要:目的建立一種漢灘型漢坦病毒(Hantaan virus,HTNV)熒光定量(RT-PCR)的檢測方法,以便快速準確地檢測HTNV。方法利用Beacon Designer7.0設計引物和探針,以HTNV的S基因片段為模板,進行實時熒光定量RT-PCR,評價此方法的特異性及靈敏度。結果建立的RT-PCR方法對HTNV的最低檢出限為4.08 copies/μL,模板Ct值與稀釋濃度的對數之間具有良好的線性關系,標準曲線方程為Y=-3.4118X+41.997,擴增效率為96.4%,R^2=0.994。結論所建立的實時熒光定量RT-PCR檢測方法靈敏度高、特異性好,可應用于HTNV的快速檢測。

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