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人類脂肪來源成體干細胞體外定向成軟骨的誘導(dǎo)實驗

作者:雷紫雄; 廖威明; 盛璞義; 付明; 何愛珊; 楊子波 中山大學(xué)附屬第一醫(yī)院關(guān)節(jié)外科; 廣州510080

摘要:目的 評價人類脂肪來源成體干細胞(hADASc)體外培養(yǎng)轉(zhuǎn)基因定向成軟骨誘導(dǎo)的可行性.方法 hADASc體外培養(yǎng)后行PGL3.轉(zhuǎn)化生長因子β1(TGF-β1)基因轉(zhuǎn)染并鑒定,檢測轉(zhuǎn)染細胞Lueiferase活性相對光讀數(shù)(RLU),再行反轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(RT-PCR)檢測和抗Ⅱ型膠原免疫組織化學(xué)染色(實驗組:轉(zhuǎn)染的hADASc,同比對照組:加入軟骨細胞定向誘導(dǎo)培養(yǎng)基的未轉(zhuǎn)染hADASc;陰性對照組:未轉(zhuǎn)染的hADASc),自動圖像分析系統(tǒng)分析免疫染色圖片并計算陽性顆粒(PU)值.結(jié)果 人類皮下脂肪體外分離培養(yǎng)出具有干細胞特征的有核組織細胞.hADASc轉(zhuǎn)染后,實驗組測得RLU值(9 212.583±315.240)高于陰性對照組(317.000±20.710,P<0.01).RT-PCR結(jié)果顯示轉(zhuǎn)染的hADASc表達TGF-β1;免疫染色結(jié)果顯示,實驗組與同比對照組呈陽性反應(yīng),且兩組PU值(13.864±2.416,13.637±2.548)均與陰性對照組的PU值差異有統(tǒng)計學(xué)意義(6.013±0.827,P<0.05).結(jié)論 人類皮下脂肪體外分離培養(yǎng)出具有干細胞特征的有核組織細胞.PGL3-TGF-β1基因轉(zhuǎn)染的hADASc可表達TGF-β1.內(nèi)源性TGF-β1可誘導(dǎo)hADASc分泌Ⅱ型膠原蛋白,與外源性TGF-β1作用相類似.

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中華生物醫(yī)學(xué)工程雜志

中華生物醫(yī)學(xué)工程雜志, 雙月刊,本刊重視學(xué)術(shù)導(dǎo)向,堅持科學(xué)性、學(xué)術(shù)性、先進性、創(chuàng)新性,刊載內(nèi)容涉及的欄目:編者導(dǎo)讀、專論、論著、新技術(shù)研發(fā)、生物技術(shù)、綜述、專題講座等。于1995年經(jīng)新聞總署批準(zhǔn)的正規(guī)刊物。

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