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常溫機械灌注修復長時間冷保存供肝的大動物實驗研究

作者:李建輝; 賈俊君; 姜驪; 周燕飛; 李浩宇; 俞浩; 謝海洋; 周琳; 鄭樹森 浙江大學醫學院附屬第一醫院肝膽胰外科; 杭州310003; 浙江大學醫學院附屬第一醫院衛生部多器官聯合移植研究重點實驗室; 杭州310003

摘要:目的探索常溫機械灌注(NMP)在挽救大動物邊緣供肝中的價值。方法 6只雄性、10 ~12月齡巴馬小型豬分為靜態冷保存(SCS)6 h組和SCS 24 h組,每組3只,分別于供肝獲取后SCS 6 h、24 h后進行2 h NMP復蘇。基于荷蘭Organ Assist公司Liver Assist系統和供體豬自身血液,整合四通道生理儀器及自制灌注管路搭建NMP平臺。在NMP過程中分別于灌注0、15、60、90、120 min 5個時間點收集灌注液用于肝功能(ALT、AST)檢測及血氣分析(p H、氧分壓)。灌注結束取肝左葉相同位置少許組織,以10%甲醛固定,用于后續HE染色。結果 NMP開始時,SCS 24 h組ALT、AST水平略高于SCS 6 h組,之后AST、ALT水平均緩慢上升。NMP開始時SCS 24 h組p H值中位數為7.28,氧分壓中位數為46 mm Hg(1 mm Hg=0.133 k Pa,下同),均低于SCS 6 h組(7.36,52 mm Hg),經過2 h NMP后SCS 24 h組p H值和氧分壓逐漸接近甚至優于SCS 6 h組。HE染色發現,灌注前SCS 24 h組肝臟充血嚴重,炎性細胞浸潤明顯;NMP 2 h后,肝臟充血明顯改善、炎性細胞減少,與SCS 6 h組無明顯差異。結論基于Liver Assist系統和供體豬自身血液成功搭建的NMP平臺,可有效改善長時間冷保存的邊緣供肝質量,提示NMP在修復邊緣供肝、擴展供肝來源方面具有重要臨床及基礎研究價值。

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